人生長分化因子15（GDF15）ELISA試劑盒技術(shù)解析與應(yīng)用指南

上海仁捷生物科技有限公司

摘要

人生長分化因子15（Growth Differentiation Factor 15，GDF15）是一種重要的細胞應(yīng)激反應(yīng)蛋白，在多種病理生理過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。本文詳細介紹了上海仁捷生物科技有限公司自主研發(fā)的GDF15 ELISA試劑盒的技術(shù)原理、性能參數(shù)、操作流程及典型應(yīng)用案例，為研究人員提供全面的技術(shù)參考。

1. 產(chǎn)品概述

1.1 GDF15生物學(xué)意義

GDF15屬于TGF-β超家族成員，又稱MIC-1（macrophage inhibitory cytokine-1），具有以下重要功能：

• 調(diào)控能量代謝平衡

• 參與炎癥反應(yīng)

• 影響腫瘤發(fā)生發(fā)展

• 與心血管疾病密切相關(guān)

1.2 上海仁捷GDF15 ELISA試劑盒特點

• 高靈敏度：檢測下限達10 pg/mL

• 寬檢測范圍：50-1600 pg/mL

• 優(yōu)異特異性：不與TGF-β家族其他成員交叉反應(yīng)

• 穩(wěn)定可靠：批內(nèi)變異系數(shù)<8%，批間變異系數(shù)<10%

• 多種樣本適用：血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清等

2. 技術(shù)原理

2.1 雙抗體夾心ELISA原理

本試劑盒采用經(jīng)典雙抗體夾心法：

1. 包被：高親和力抗GDF15單抗預(yù)包被于微孔板

2. 結(jié)合：樣本中GDF15與包被抗體特異性結(jié)合

3. 檢測：加入生物素標(biāo)記的二抗

4. 信號放大：鏈霉親和素-HRP復(fù)合物結(jié)合

5. 顯色：TMB底物顯色反應(yīng)

2.2 檢測系統(tǒng)優(yōu)化

• 抗體配對：經(jīng)過嚴(yán)格篩選的高效抗體對

• 信號放大：生物素-親和素放大系統(tǒng)

• 干擾控制：特殊緩沖體系降低基質(zhì)效應(yīng)

3. 實驗操作指南

3.1 樣本處理建議

3.2 標(biāo)準(zhǔn)操作流程

1. 試劑準(zhǔn)備（室溫平衡30min）

2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品/樣本各100μL）

3. 37℃孵育90min

4. 洗板（自動洗板機推薦）

5. 加檢測抗體（100μL/孔）

6. 37℃孵育60min

7. 洗板

8. 加酶結(jié)合物（100μL/孔）

9. 37℃孵育30min

10. 洗板

11. 顯色（TMB，15min）

12. 終止反應(yīng)

13. 450nm讀數(shù)

3.3 數(shù)據(jù)分析

• 四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線

• 質(zhì)控要求：R2≥0.99

• 推薦使用專業(yè)ELISA分析軟件

4. 典型應(yīng)用案例

4.1 心血管疾病研究

案例：急性心肌梗死患者血清GDF15動態(tài)監(jiān)測
方法：收集50例AMI患者發(fā)病后0、6、12、24、48h血清樣本
結(jié)果：GDF15水平在發(fā)病6h顯著升高，與心肌損傷程度正相關(guān)（r=0.72）

4.2 腫瘤研究

案例：結(jié)直腸癌患者預(yù)后評估
方法：檢測120例患者術(shù)前血清GDF15水平
結(jié)果：高GDF15組（>200pg/mL）5年生存率顯著低于低水平組（38% vs 72%）

4.3 代謝性疾病研究

案例：2型糖尿病肥胖患者干預(yù)研究
方法：檢測生活方式干預(yù)前后GDF15變化
結(jié)果：有效減重組GDF15下降幅度顯著（P<0.01）

5. 常見問題解決方案

5.1 技術(shù)問題排查

5.2 結(jié)果解讀要點

• 注意樣本采集時間（晝夜節(jié)律影響）

• 考慮藥物干擾（如二甲雙胍可升高GDF15）

• 結(jié)合臨床其他指標(biāo)綜合分析

6. 產(chǎn)品服務(wù)支持

6.1 上海仁捷特色服務(wù)

• 免費技術(shù)咨詢：專業(yè)團隊提供實驗設(shè)計指導(dǎo)

• 方法學(xué)驗證服務(wù)：協(xié)助完成方法學(xué)比對

• 定制化服務(wù)：可根據(jù)需求調(diào)整檢測范圍

關(guān)鍵詞：GDF15、ELISA試劑盒、上海仁捷生物、心血管標(biāo)志物、腫瘤標(biāo)志物、代謝調(diào)控